溶出度試驗的重要性已毋庸置疑，該實驗在口服固體制劑品質(zhì)評價和仿制藥研發(fā)中愈來愈發(fā)揮出舉足輕重的作用，而尋找到客觀存在、并確定出最能體現(xiàn)原研制劑內(nèi)在優(yōu)良品質(zhì)、具有區(qū)分力的溶出曲線才是本實驗的重中之重，本文將就此展開論述。

溶出度試驗在評價口服固體制劑內(nèi)在品質(zhì)和仿制藥研發(fā)中愈來愈發(fā)揮出舉足輕重的作用，尤“在多種pH值溶出介質(zhì)中溶出曲線的測定和比對”更是成為“剖析”和“肢解”固體制劑內(nèi)在品質(zhì)一種擘肌分理、抽絲剝繭的重要手段;成為口服固體制劑內(nèi)在品質(zhì)呈現(xiàn)于外在的一種“表象”、“映射”和“載體”。現(xiàn)今，人們愈發(fā)關注溶出度試驗的區(qū)分力，即什么樣的溶出曲線最能代表產(chǎn)品內(nèi)在品質(zhì)、最適合評估仿制制劑處方篩選與工藝開發(fā)、最能在仿制制劑與原研制劑體外溶出行為比較時體現(xiàn)出差異性，最具有體內(nèi)外相關性，且最適合制訂入質(zhì)量標準等問題，本文將就此展開討論。

既有質(zhì)量標準的局限性

國內(nèi)質(zhì)量標準
由于之前的多年，國內(nèi)對溶出度試驗未給予高度重視和科學認知，無論是在新藥審評還是在藥檢機構后期制訂國家標準時，出發(fā)點皆是為了讓既有產(chǎn)品合格來擬定試驗參數(shù)，故目前很多國內(nèi)質(zhì)量標準均擬定得較為寬松(如高轉(zhuǎn)速、加入高濃度表面活性劑甚至有機溶劑、采用溶解度大的溶出介質(zhì)等)，無區(qū)分力，借鑒性不強。
國外質(zhì)量標準與進口質(zhì)量標準
由于溶出度試驗的重要性，故在我們所能查閱獲取的質(zhì)量標準中，很多品種的溶出度試驗均具有一定的“隱晦性”。當我們獲取數(shù)批原研制劑、按照質(zhì)量標準試驗條件檢測時，結(jié)果往往都是較為快速釋放情形(最多30min就已達85%)。深度剖析測定原研制劑后發(fā)現(xiàn)，實驗條件很多不具區(qū)分力，即便美國FDA公布的溶出度數(shù)據(jù)庫中有的品種也如此。在FDA/CDER屬下的仿制藥辦公室于2012年下半年推出的、“質(zhì)量源于設計”理念應用于仿制藥研發(fā)——速釋與緩控釋制劑2個研發(fā)模板中就列舉了以上條件不具備區(qū)分力的研發(fā)案例。所以，若我們盲目迷信以上這些標準，秉承“照本宣科的拿來主義”，就會在仿制藥開發(fā)和品質(zhì)評價時誤入歧途，甚至劍走偏鋒，造成錯誤判斷。
但我們?nèi)砸陀^認知到：國外這些質(zhì)量標準的“韜光養(yǎng)晦”是被允許的，因為本行業(yè)為高科技、高利潤、高附加值產(chǎn)業(yè)，原研企業(yè)出于自身利益考慮，將最具區(qū)分力的內(nèi)控方法試驗條件予以保密，對外公開了較為寬松的貨架期質(zhì)量標準。這種行為無可厚非。重要的是：作為追趕者，我們的工作一定要基于對參比制劑的深度剖析和解讀，秉承“知己知彼、百戰(zhàn)不殆”的思想，獲取數(shù)批參比制劑、檢測關鍵屬性，當發(fā)現(xiàn)既有質(zhì)量標準不科學時決不能抱殘守缺、以訛傳訛，應予以客觀合理的更改完善。所以，國家藥品審評中心早在2003年就提出了“仿產(chǎn)品不是仿標準”的指導思想，其中的標準涵蓋所有國內(nèi)外既有質(zhì)量標準。

何種溶出曲線具有區(qū)分力

本文將分別從最具開發(fā)難度、最具“制劑含金量”的五大類產(chǎn)品進行闡述：
pH值依賴性藥物制劑
在進行了“pH值-溶解度”曲線測定后(至少8個點)，便可從趨勢中得知本品是否為pH值依賴性制劑。若為本類型，通常會在50rpm條件下，出現(xiàn)如下情形：溶解度高的介質(zhì)中15min達85%的快速釋放和在溶解度低的介質(zhì)中120min都達不到85%的慢速釋放。這兩種情形均非內(nèi)在品質(zhì)呈現(xiàn)于外的最佳體現(xiàn)，因過于快速和過于慢速均不具備區(qū)分力。
此時，應對溶解度急劇變化的pH值段予以細分(±0.5)，找到45~60min達85%的pH值介質(zhì)和90~120min達85%的pH值介質(zhì)，且溶出曲線應無拐點和突釋，這樣的兩條曲線被認為是既不慢、又不快，最具區(qū)分力。原因如下：
很多藥典的溶出度試驗默認45min、限度70%就是基于這種考慮：>70%+15%(通常的允許落差)>85%，此時的曲線被認為是具有代表性的溶出行為。同時，對于速釋制劑而言，藥物在人體胃內(nèi)排空時間最長不超過120min，且超過該時間點也被認為不適用于日常企業(yè)的檢測和品質(zhì)監(jiān)督，因此第二條特征曲線被限定在120min內(nèi)達到85%，這也是目前既有質(zhì)量標準中幾無120min后取樣時間點的原因。此處需強調(diào)的是，針對釋放慢的介質(zhì)，無需放寬試驗參數(shù)，最終溶出量未達85%仍可進行仿制制劑與原研制劑的曲線比較，因已有三條曲線達85%、且其中還含有區(qū)分力介質(zhì)，故該介質(zhì)無需再深入研究。
難溶性口服固體制劑
如在50rpm條件下任何一個介質(zhì)在120min均達不到85%，則建議放寬溶出度試驗參數(shù)，仍是應盡可能采用低轉(zhuǎn)速和低濃度表面活性劑，仍是以45~120min達到85%的條件確定為具有分辨力的溶出行為。
治療窗狹窄藥物制劑
鑒于臨床使用的安全性，此類藥物的體內(nèi)/體外釋放行為均極為關鍵，故質(zhì)量標準中常擬定兩點法：通常第一時間點釋放量不得過某限度以防止突釋，第二點釋放量不得少于某限度以保證全部釋放。如卡馬西平片，《日本溶出曲線數(shù)據(jù)庫》擬定5min不得過60%和30min不得少于70%;美國藥典擬定10min釋放量應為30~50%，45min時不得少于75%。兩點法的規(guī)定即限定了溶出曲線的具體行為，又可有效防止處方中加入大量表面活性劑或增溶劑的“投機取巧”作法，值得借鑒。
緩控釋制劑
一般設定50rpm、并以每天服用次數(shù)設定取樣時間點，如每天1次應測定至24h，并在該時間內(nèi)曲線應呈緩慢上升狀，且無突釋和拐點。
為更全面地進行仿制制劑的開發(fā)與品質(zhì)評價，還應分別比較不同轉(zhuǎn)速下與原研制劑溶出曲線的一致性，如50rpm(呈現(xiàn)24h釋放情形)、100rpm(呈現(xiàn)12h釋放情形)、200rpm(呈現(xiàn)8h釋放情形);且有時在制訂質(zhì)量標準時，為提高質(zhì)檢科檢測效率，擬定200rpm、8h釋放控制的質(zhì)量標準也是可以的。如阿斯利康制藥有限公司(江蘇無錫)出品的非洛地平緩釋片，用法用量為一天一片，但質(zhì)量標準卻擬定槳板法/200rpm、7h的取樣測定就是基于該考慮。
腸溶制劑
針對該類制劑在體內(nèi)吸收的特性，體外溶出曲線的研究和比較應進行多方面、多層次、多角度，具體如下：
(1)100rpm pH1.2介質(zhì)(2小時) 釋放量不得過10.0%。
采用100rpm是為防止在身體機能強壯者體內(nèi)的釋放量符合釋放要求。
(2)100rpm pH4.5介質(zhì)(2小時) 釋放量不得過10.0%。
采用pH4.5介質(zhì)是為防止藥物在中老年人群胃內(nèi)的釋放量符合釋放要求。該部分人群因年齡增長，胃酸分泌逐漸缺乏，胃內(nèi)環(huán)境pH值呈上升狀態(tài)。所以，英國藥典自2006年版起，奧美拉唑腸溶膠囊和腸溶片如此要求便是出于該考慮。
(3)50rpm pH6.0介質(zhì) 注意延遲釋放
腸溶制劑在十二指腸處的釋放極為重要，故應研究該pH值;且原研制劑往往呈現(xiàn)延遲釋放行為，此時仿制制劑也應具有該現(xiàn)象，否則在進行體內(nèi)生物等效性試驗研究時，Tmax往往不一致，導致試驗失敗，臨床療效出現(xiàn)不一致。
同時，還建議進行溶出介質(zhì)稀釋5倍后的比較評價，因腸溶制劑在體內(nèi)的吸收易受體內(nèi)離子強度的影響，故體外應考慮低濃度溶出介質(zhì)的檢測研究。
(4)100rpm pH6.0介質(zhì) 注意延遲釋放
考慮到人體內(nèi)十二指腸蠕動的多重性，并為防止藥物在體內(nèi)發(fā)生“劑量傾瀉”行為，故應進行該情形的研究。
(5)50rpm pH6.8介質(zhì) 注意延遲釋放
注釋同pH6.0介質(zhì)。
(6)50rpm pH1.2介質(zhì)(2小時)+ pH6.8介質(zhì)
為模擬藥物在人體內(nèi)的實際情形還應進行混合介質(zhì)的研究。筆者曾接觸過數(shù)個生物等效性(BE)試驗失敗案例，折回后再進行混合介質(zhì)比較才發(fā)現(xiàn)仿制制劑與參比制劑體外溶出行為的顯著性差異，只好再度完善仿制制劑處方與工藝。這充分揭示了體外溶出度研究比較的全面性至關重要。
(7)50rpm pH4.5介質(zhì)(2小時)+ pH6.8介質(zhì)
注釋同pH1.2介質(zhì)。


圖1. 日本一腸溶制劑仿制藥研發(fā)體外溶出曲線比對實例。(左上：槳板法50rpm、pH1.2介質(zhì);右上：槳板法50rpm、pH6.0介質(zhì);左下：槳板法50rpm、pH6.8介質(zhì);右下：槳板法100rpm、pH6.0介質(zhì)。)

討論與總結(jié)

目前溶出度試驗的重要性已深入人心，且國家藥品審評中心也已于2011年4月針對仿制制劑的研發(fā)出臺了強制性要求。但在具體實施時，很多同仁依舊秉承照搬照抄、甚至抱殘守缺既有質(zhì)量標準的思想;或是為了讓自我既有產(chǎn)品合格的出發(fā)點，采用了寬松、沒有區(qū)分力的試驗條件，未能從原研制劑入手來深度剖析獲取其關鍵特性、獲取具有區(qū)分力的溶出度試驗條件和溶出行為。
文獻從制劑各要素角度闡述了溶出度檢查法的分辨力。本文在總結(jié)大量實際案例和對多個品種原研制劑深度剖析解讀的基礎上，從分析角度直觀給出了何種溶出曲線最具區(qū)分力的觀點。只要把握好以上這些具有區(qū)分力的溶出曲線/行為，才能在仿制制劑處方工藝開發(fā)、仿制藥品質(zhì)評價、質(zhì)量標準的制訂等諸多方面發(fā)揮出事半功倍、畫龍點睛之效，期望能為眾人工作起到拋磚引玉的作用。