mRNA特點- mRNA疫苗將外源目的基因序列通過轉(zhuǎn)錄、合成等工藝制備的mRNA通過特定的遞送系統(tǒng)導(dǎo)入機體細胞，直接在體內(nèi)表達目的蛋白，刺激機體產(chǎn)生特異性免疫學(xué)反應(yīng)，從而使機體獲得免疫保護。mRNA具有以下特點：能導(dǎo)入細胞，在體內(nèi)表達相應(yīng)的抗原蛋白，避免了體外蛋白表達、純化過程；能夠刺激免疫系統(tǒng)產(chǎn)生體液免疫和/或細胞免疫應(yīng)答，發(fā)揮相應(yīng)的免疫預(yù)防和/或免疫治療作用；能夠通過刺激機體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生多種細胞因子等方式增強機體免疫反應(yīng)能力或改變免疫應(yīng)答類型；由于mRNA的降解是通過細胞正常代謝完成，降低了因感染或整合誘發(fā)基因突變的潛在風(fēng)險，此類型疫苗具有其獨特的優(yōu)勢。
基于mRNA疫苗的作用機制和特點，美迪西生物技術(shù)藥物分析部門為支持mRNA疫苗的安全性和有效性評價，建立了涵蓋代謝及生物分布，到總抗體、關(guān)鍵序列結(jié)構(gòu)域抗體和抗病毒中和抗體效價，以及細胞免疫應(yīng)答反應(yīng)效力的系列評價技術(shù)平臺。
mRNA水平生物分布分析- 美迪西擁有ABI7500系列Real-Time PCR擴增儀器以及配套的Kingfisher 核酸提取儀設(shè)備，可基于RNAase free管收集的Trizol保存的全血樣品以及其它類型的組織樣品通過后續(xù)的RT-qPCR技術(shù)進行mRNA的代謝與分布分析。
△實時PCR檢測mRNA表達水平
mRNA表達蛋白抗原的生物分布分析- mRNA疫苗需要在體內(nèi)翻譯成蛋白質(zhì)后才能刺激機體進一步產(chǎn)生免疫應(yīng)答，因此在蛋白層面上確認mRNA的表達水平和分布尤為重要。美迪西生物藥分析部擁有多臺Molecular Device M4系列酶標(biāo)儀及新型iD5系列酶標(biāo)儀，MSD系列電化學(xué)發(fā)光分析儀等支持多種類型的免疫分析方法，可以執(zhí)行mRNA所翻譯蛋白抗原水平的不同靈敏度范圍的檢測和監(jiān)測。酶聯(lián)免疫分析(EIA)熒光免疫分析(FIA)時間分辨熒光（TRFIA）熒光共振能量轉(zhuǎn)移（FRET）化學(xué)發(fā)光（CLIA）電化學(xué)發(fā)光（ECL）
△試驗所用酶標(biāo)儀及電化學(xué)發(fā)光分析儀
T細胞因子分泌水平評價- mRNA疫苗除引起B(yǎng)細胞體液免疫反應(yīng)產(chǎn)生抗體外，也可刺激引起細胞的免疫反應(yīng)，美迪西生物技術(shù)藥物分析部門擁有MSD、luminex、FACS CBA等多個多重細胞因子分析平臺提供節(jié)約樣本、節(jié)約成本模式的細胞因子分析技術(shù)支持，甚至ELISPOT單細胞層面的細胞因子豐度變化分析。MSD Multi PlexLuminex MultiplexFACS CBA
△細胞因子豐度分析
△多重細胞因子分析平臺
總抗體、關(guān)鍵結(jié)構(gòu)域抗體效價分析- 常規(guī)的B細胞分泌抗體效價評價主要基于間接ELISA的滴度檢測方法，美迪西技術(shù)團隊核心成員早年致力于核酸及蛋白疫苗產(chǎn)品研究，獲得過相關(guān)專利，且在美國本土的pfizer公司接受過疫苗效價生物分析評價的系列培訓(xùn)，基于實踐經(jīng)驗建立了系列方法評價體系和標(biāo)準(zhǔn)制定規(guī)則，用于考察疫苗總抗體、關(guān)鍵結(jié)構(gòu)域抗體效價以及評判它們的相關(guān)性。美迪西生物技術(shù)藥物分析部門也可以基于MSD平臺，利用經(jīng)驗證試劑盒直接進行基于SARS-CoV-2五種不同的重要mRNA表達抗原SARS-CoV-1 Spike, SARS-CoV-2 N, SARS-CoV-2 S1 NTD, SARS-CoV-2 S1 RBD, and SARS-CoV-2 Spike的IgG、IgM、IGA檢測。V-PLEX SARS-CoV-2 Panel 1 (IgG)V-PLEX SARS-CoV-2 Panel 2 (IgM)V-PLEX SARS-CoV-2 Panel 3 (IgA)
基于競爭性Assay或假病毒的中和抗體分析- 美迪西疫苗分析技術(shù)平臺除了既可以基于電化學(xué)發(fā)光MSD平臺應(yīng)用競爭性的配體結(jié)合分析方法執(zhí)行例如新冠mRNA疫苗體內(nèi)表達抗原所刺激的功能性抗體即中和抗體分析，也有獨立細胞房等設(shè)備設(shè)施以進行基于假病毒與表達ACE2細胞株相互作用的中和抗體分析。
△競爭性配體結(jié)合法(CLBA)的中和抗體檢測原理
△Cell-based中和抗體檢測原理
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