雙靶點CAR-T的脫靶檢測可以采用多種方法，包括MPA試驗、組織交叉反應（TCR）和體外細胞殺傷試驗等。以MPA試驗為例，其檢測過程需要根據雙CAR的結構策略來進行抗體的合成和開展MPA試驗。總體原則是合成的、用于MPA檢測的抗體結構要盡量反映T細胞表面表達的CAR的真實結構。例如，如果雙CAR是串聯在一起的，即它們形成了一個二價串聯抗原識別結構，那么可以合成一個類似的二價串聯抗體進行MPA檢測，來評估CAR-T對不同抗原的特異性結合能力，從而判斷其是否存在脫靶效應。如果雙CAR是分開的，那么需要分別針對每個靶點，合成含有CAR結構的抗體，然后進行兩個獨立的MPA檢測。

首先應采用多種體外方法（MPA、TCR、體外細胞殺傷）來評估CAR-T的脫靶毒性，考慮到各種方法的周期、便捷性和費用，同時又能及早的發現CAR-T的脫靶毒性，建議在CAR的早期篩選階段先采用不同細胞株的體外殺傷檢測，來確定候選CAR。針對篩選確定的候選CAR，建議在開展首次人體試驗前進行MPA檢測和人體冰凍組織交叉反應試驗。