第一，在肝微粒體、肝細胞體外代謝模型中，孵育時間需設置合理，這個合理是基于人體肝微粒體或者肝細胞穩定性的結果而設定的。如果體系孵育時間過長或過短，則可能引起代謝產物種類和量偏少或偏多，這對最終判定一個代謝產物的比例或結果起絕對性的一個作用。

第二，在體外和體內代謝產物鑒定試驗中，如有紫外檢測器和質譜檢測器數據，通常需要把兩者結合在一起分析，大部分情況下兩者的信號能夠匹配。但是紫外檢測器和質譜檢測器的特點不同，質譜檢測器相對而言靈敏度更高。而對一些含量相對比較低的代謝產物，紫外檢測器可能檢測不到。

第三，在代謝產物的結構、母核類似的情況下，代謝產物間的紫外強度數據可能比質譜檢測數據更可靠。

對于創新化學藥相關動物種屬選擇是基于目前現代色譜與與質譜的分析方法，通過體外代謝模型來比較動物種屬與人代謝的相似性來確定相關種屬，包括：分析代謝反應類型、代謝產物種類以及量的差異。

體外的代謝體系常見的有：

● 肝微粒體代謝試驗

● 肝細胞試驗

● s9的實驗

在肝微粒體中通常可以見到Ⅰ相代謝產物。

通過體外代謝產物鑒定結果同時結合早期動物不同種屬體內代謝產物鑒定結果來為綜合確定IND藥代安評最終種屬提供重要依據。

另外如果我們通過體外的代謝產物鑒定結果，進入了正式的藥代安評體內階段的話，我們可以采集藥代或毒代里面的一些樣品比如說血漿或者說排泄物去分析更復雜體內環境代謝產物的產生的情況。

通常是先開展體外的代謝產物鑒定。比如說通過肝微粒體體外代謝產物（Ⅰ相代謝產物）的鑒定結果和肝細胞中既含Ⅰ相又含Ⅱ相代謝產物的一個結果跟人的體外代謝產物去比較，如果非人種屬體外肝細胞或者肝微粒體的結果和人能夠較好匹配一致，那么我們從體外角度可以得到較為相關的嚙齒類和非嚙齒類相關種屬；如果這兩個體外系統得出的結果一致性差異較大，比如說肝微粒體傾向于猴，肝細胞傾向于犬，建議從體內角度同時增加體內代謝產物的鑒定結果來綜合判斷。

雖然常規的流程可能是先開展體外的一個代謝產物鑒定結果，但是基于目前實驗條件以及可行性方面的考慮同時去開展體內的各個種屬的代謝產物鑒定其實不是難事，那么我們可以得到更為可靠的數據，繼續往前推進。

有時在體外代產物問題結果不太確定的情況下強烈建議大家再往前進一步去拿到體內的一個體內的代謝產物鑒定結果去比較。

如果體內的代謝產物鑒定結果與體外的人的一個代謝產物鑒定結果能夠匹配的話，我們可以就確定較為相關的嚙齒類和非嚙齒類相關種屬。

如果體內代謝產物鑒定結果與體外人的一個代謝產物鑒定結果不是特別匹配，那么在這種情況下我們通常選擇與人最近的嚙齒類和非嚙齒類種屬。

在綜合分析數據的情況下，在臨床前階段，通常只有肝微粒體或者肝細胞的MetID數據，在僅有的數據前提下同時結合動物體內的MetID去匹配體外人的MetID結果，為毒理種屬選擇提供重要的依據。

對于這個問題并不是只要產生代謝產物就一定要對其進行監測，還存在一個量方面的考慮,所以 FDA MIST 和ICH M3(R2)里有指導只有在人體代謝產物的暴露量超過藥物相關總暴露量的10%，且在人體中暴露量水平明顯高于毒理學試驗中動物最大暴露量時，才需要對該代謝產物進行非臨床評價以支持Ⅲ期臨床試驗。

但通常我們的實際情況是非臨床階段沒有臨床人體代謝產物相關的數據，最終這就是一個對比。

動物體內代代謝產物暴露量與人體代謝產物暴露量的情況，按照排列組合通常會有以下 4 種情況出現：

（1）、代謝產物里邊在人體是特有的，動物里面沒有

（2）、人體有但含量比較低，在動物體內含量相對比較高

（3）、動物里特有，人體里沒有

（4）、人體里代謝產物含量相對比較高，動物體內相對比較低。