分子克隆技術(shù)服務(wù)
克隆構(gòu)建是分子生物學(xué)研究中最常用到的手段之一,我們提供包括克隆構(gòu)建及其上下游相關(guān)服務(wù)的完整解決方案,并將依據(jù)目的基因的來(lái)源,靈活選擇不同的克隆方法,包括從基因組中分離目的基因,由特定mRNA逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA后再進(jìn)行克隆和PCR體外擴(kuò)增目的片段進(jìn)行克隆等。
1、載體構(gòu)建
可根據(jù)已有載體進(jìn)行改造方案的設(shè)計(jì),完成現(xiàn)有載體不同功能元件的改造;可應(yīng)客戶要求將指定片段亞克隆至各載體。
(1)您需要提供:載體改造的具體要求、預(yù)進(jìn)行改造的質(zhì)粒(序列經(jīng)測(cè)序驗(yàn)證正確)及其圖譜和序列、能夠獲得所需元件或基因的模板(質(zhì)粒或其它)及其相關(guān)圖譜和序列。
(2)我們提供:構(gòu)建好的質(zhì)粒、菌種,測(cè)序驗(yàn)證報(bào)告。
2、ORF克隆
從動(dòng)物組織或細(xì)胞中提取mRNA,通過(guò)RT-PCR擴(kuò)增獲得所需目的基因,或提供質(zhì)粒模板,PCR擴(kuò)增獲得所需目的基因,并克隆到由客戶指定的載體當(dāng)中。
(1) 您需要提供:目的基因序列,能夠獲得目的基因序列的質(zhì)粒或總RNA。
(2) 我們提供:設(shè)計(jì)方案,合成引物,最終提供含有目的基因的質(zhì)粒、菌種及測(cè)序報(bào)告。
3、PCR產(chǎn)物克隆
直接將客戶提供的PCR產(chǎn)物(含或不含相應(yīng)酶切位點(diǎn))克隆至指定載體中。
(1) 您需要提供:總量不少于1ug的PCR產(chǎn)物。
(2) 我們提供:含有目的片段的質(zhì)粒和菌種及測(cè)序驗(yàn)證報(bào)告。
4、定點(diǎn)突變
體外定點(diǎn)突變技術(shù)是研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和功能之間的復(fù)雜關(guān)系的有力工具,也是我們?cè)趯?shí)驗(yàn)室中改造、優(yōu)化基因的常用的手段,包括一段堿基的添加、刪除、替換等。
(1) 您需要提供:原始質(zhì)粒、質(zhì)粒圖譜(包括大小信息)和序列、突變位點(diǎn)要求。
(2)我們提供:突變成功的質(zhì)粒和菌株及測(cè)序報(bào)告。
實(shí)驗(yàn)室成功構(gòu)建的質(zhì)粒:真核表達(dá)質(zhì)粒、原核表達(dá)質(zhì)粒、報(bào)道基因質(zhì)粒、小分子干擾質(zhì)粒等等。

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