2017年8月31日，美國FDA批準了第一個基因治療方法CAR-T細胞療法的藥物。該藥物靶向抗原CD19，是一種表達于多種血液腫瘤細胞表面的抗原蛋白，包括B細胞淋巴瘤和白血病細胞，用于治療25歲以下復發性或難治性B-細胞急性淋巴細胞白血病患者。
CAR-T療法是利用病人自身的免疫細胞來清除癌細胞。嚴格來說，這是一種細胞療法，而不是一種藥，嵌合抗原受體T細胞免疫療法作為細胞療法的代表，能從患者體內分離出T細胞，并引入靶向腫瘤抗原的嵌合抗原受體（CAR）。這些受體能引導T細胞進攻癌細胞，從而對后者造成殺傷。
CAR-T細胞治療產品與其它非體內擴增藥物完全不同，這種不同不僅體現在個體化、產量小及批次有限等方面 ，而且存在起始材料差異大、制備工藝不成熟、生物學效力以及安全性評價復雜等問題。
2020年04月16日，美迪西藥理部高級主任
韋毅博士見招拆招，詳細解答了CAR-T細胞療法非臨床研究中四大階段：體外藥效學研究、體內藥效學研究、藥代動力學研究和安全性研究的各種問題。美迪西臨床前研究服務建立了與國際對標的研究操作流程和質量體系，擁有國際AAALAC認證和中國NMPA認證，GLP實驗室同時達到美國FDA、澳洲TGA等國際標準。同時，美迪西把握免疫治療和靶向治療腫瘤新趨勢，不斷開拓和完善新興腫瘤治療的臨床前研究平臺。
一、CAR-T 體外藥效學研究
1、有哪些體外試驗可以檢測CAR-T的效力？
將CAR-T細胞與腫瘤靶細胞體外共同孵育后檢測腫瘤殺傷率或增殖抑制率；
IFN-γ的表達量；
CAR-T細胞上某種與殺傷相關的細胞表型的變化等。
2、如何評判所選的體外效力檢測方法是否有效？
在早期的方法學驗證時，要分析方法的專屬性，證明其生物學效力與CAR-T細胞具有一定的量效關系，并考慮采用體內法驗證體外法的有效性。
二、CAR-T 體內藥效學研究
1、非臨床研究的體內試驗的受試物來源有哪些？
動物來源，進行Proof-of-Concept；
健康志愿者捐贈的血液，臨床擬用產品；
患者的血液，一般不必要使用。
2、目前常用的CAR-T藥物非臨床研究動物模型有哪些？
同源小鼠模型
完整的免疫系統，鼠源CAR-T細胞可以靶向性與體內腫瘤相關抗原（TAA）結合。僅限于鼠源細胞制備的CAR-T產品。
轉基因小鼠模型
免疫系統正常鼠，表達人的TAA，研究對象需要為鼠源細胞。
移植瘤小鼠模型
免疫缺陷小鼠中移植人源腫瘤，可用來研究人源CAR-T細胞對人源腫瘤的作用。
免疫系統重建人源化小鼠
通過向免疫缺陷鼠移植人免疫細胞制備得來。
*目前常用移植瘤小鼠模型研究CAR-T細胞對腫瘤的抑制作用。
3、體內檢測常用的檢測方法和評價指標有哪些？
| 檢測方法 | 評價指標 |
| 生物發光成像技術BLI | 熒光強度表示腫瘤荷載量 |
| 流式細胞術 | 體內腫瘤細胞數量 |
| 免疫學方法ELISA、MSD等 | 血清中與腫瘤相關的細胞因子變化 |
| 常規藥理學、病理學 | 腫瘤相關參數 |
4、體內藥效檢測的試驗設計要注意哪些問題？
包含不同的劑量水平以體現量效關系；
需設置T細胞對照組（未轉染的T細胞）；
建議使用來自不同捐贈者生產的CAR-T細胞研究，評估藥效穩定性；
增加或者設置衛星組。
三、CAR-T藥代動力學研究
1、CAR-T療法PK研究的重要性
CAR-T細胞產品具有較強的靶向細胞殺傷活性，與人體內的非腫瘤細胞結合，可引起嚴重的脫靶副作用。
CAR-T細胞的體內效力又依賴于細胞的有效增殖及免疫記憶的形成。
2、藥代研究動物模型如何選擇？
CAR-T細胞產品具有較強的靶向細胞殺傷活性，與人體內的非腫瘤細胞結合，可引起嚴重的脫靶副作用。
3、CAR-T藥代的檢測技術有哪些？
成像技術；
流式細胞術；
免疫組化技術；
定量PCR技術等。
四、CAR-T非臨床安全性研究
1、CAR-T細胞產品的安全性風險主要包括：
細胞因子釋放綜合征（CRS）；
可逆的神經毒性；
B細胞減少；
靶向與脫靶（on-target/off-tumor）；
CAR-T細胞的成瘤性/致瘤性。
2、CAR-T細胞的非臨床安全性研究是否需要在GLP條件下進行？
CAR-T細胞治療產品的非臨床安全性評價研究也應遵從《藥物非臨床研究質量管理規范》（GLP）。
美迪西獲得了AAALAC 認證和國家藥品監督管理局（NMPA）GLP 證書，GLP實驗室同時達到美國FDA的GLP標準，研究數據受澳大利亞藥品監督管理局的認可。同時我們建立了與國際接軌的研究操作流程和質量體系，符合國內外研發標準及監管要求。
3、CAR-T細胞的非臨床安全性研究中受試物如何準備？
鑒于CAR-T產品制備過程的特殊性，委托方應提供受試物完整的質量分析數據報告，并應提供覆蓋所有給藥濃度以及模擬所有運輸過程、處理操作、直至動物給藥前過程的受試物穩定性研究數據。
受試物在到達研究機構后，如果在給藥前需要經過復蘇、重懸等處理操作，研究機構至少要對細胞形態、活細胞總數、細胞活率、顏色、除細胞之外的其它外源性異物等進行觀察或檢測。
如果受試物到達研究機構后可以不經處理直接給藥（在穩定性允許的時間范圍內），則上述檢測可以由委托方進行。
4、如何利用已有人體試驗數據？
如果已有的人體數據在經過科學地評估后，可以提示細胞治療產品的有效性與安全性，可以保證臨床受試者安全性，則非臨床研究可以本著具體品種具體分析的原則免除不必要的動物試驗。
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