由于腫瘤機制的多樣性和復雜性，聯(lián)合治療已經(jīng)成為腫瘤治療研究的趨勢和共識。本文將溶瘤病毒與CAR-T免疫療法結(jié)合，所產(chǎn)生的驚人效果令人振奮。美迪西緊跟國際免疫腫瘤藥物研發(fā)趨勢，推進國內(nèi)外客戶新藥研發(fā)進程，拓寬其在創(chuàng)新藥物熱點領(lǐng)域的發(fā)展布局。公司在腫瘤模型方面，尤其是免疫腫瘤動物模型評價系統(tǒng)領(lǐng)域，引進國際先進的PET-CT影像系統(tǒng)、放療輻射系統(tǒng)、IVIS小動物成像系統(tǒng)，多通道流式細胞分析儀等精密儀器設(shè)備，開發(fā)藥物研發(fā)關(guān)鍵技術(shù)，系統(tǒng)性地建立了超過250種腫瘤模型。公司長期為國際大型抗腫瘤藥物公司武田制藥等客戶提供抗腫瘤藥物研究服務(wù)。

    作為兩種目前極為熱門的腫瘤免疫手段，溶瘤病毒和CAR-T療法（嵌合抗原受體T細胞免疫療法）近年來被很多公司和科研中心所青睞，研究進展也不斷更新。然而在發(fā)展中的CAR-T療法由于無法限制性的轉(zhuǎn)移識別腫瘤抗原，并且很難克服腫瘤微環(huán)境對CAR-T細胞的影響，因此關(guān)于CAR-T的研究在安全性上有所顧慮，并且無法將治療的領(lǐng)域延伸至實體瘤。

    該研究的作者之一Saul Priceman教授說，“第一，實體瘤上，適合T細胞用CAR重定向的靶標有限。第二，實體瘤被所謂的免疫抑制性腫瘤微環(huán)境包圍，當一種CAR-T細胞試圖進入腫瘤，存活下來并殺死癌細胞時，會因為這種屏障而無法有效發(fā)揮作用。溶瘤病毒能夠突破這一屏障。”

    反觀溶瘤病毒，因其可以特異性的靶向腫瘤，具備良好的免疫原性和攜帶外源基因定向轉(zhuǎn)入腫瘤的能力，已成為針對實體腫瘤的有前景的治療手段。作為首個批準臨床使用的溶瘤病毒類藥物T-VEC，研究發(fā)現(xiàn)它可以將可溶性的腫瘤抗原暴露并且引導宿主的抗腫瘤免疫反應(yīng)。

    文章的研究正是利用了這一點，將溶瘤病毒作為CAR-T細胞進軍實體瘤的”司機"。他們通過基因工程改造了一種溶瘤病毒，使其進入腫瘤細胞，迫使細胞在表面表達截短的CD19（CD19t）。文中的實驗顯示，這種溶瘤病毒（被稱為OV19t）能在三陰性乳腺癌細胞系以及胰腺癌、前列腺癌、卵巢癌和頭頸癌、腦腫瘤細胞中起效。

    01 溶瘤病毒成功將CD19t遞送給實體瘤細胞（體外）

    研究人員使用嵌合PSE啟動子和CD19t的骨肉瘤溶瘤病毒去大范圍感染不同種類的實體瘤。為了能夠更直觀的表達溶瘤病毒轉(zhuǎn)染癌細胞的能力和癌細胞表面CD19t的表達，研究人員對腫瘤細胞進行了染色。用溶瘤病毒感染癌細胞后，癌細胞在其表面表達了豐富的CD19。進一步，研究人員利用流式細胞術(shù)量化測量了不同時間段里腫瘤細胞表面CD19t的表達，發(fā)現(xiàn)在轉(zhuǎn)染72小時后，仍有70%的腫瘤細胞可以檢測到CD19t的表達，這就給CAR-T細胞的特異性識別和靶向提供了充足的時間。

    之后，研究人員在來自多種實體瘤（包括胰腺癌、前列腺癌和卵巢癌）的細胞中測試了「OV19t+CD19-CAR-T」聯(lián)合療法。

    02 實體瘤表達的CD19t能夠重新引導CD19-CAR-T細胞的活動和細胞毒性（體外）

    在這一步的驗證中，研究人員將感染了OV19t的腫瘤細胞和CD19-CAR T細胞共孵育，并用T細胞表面CD25和4-1BB的表達來指征T細胞的激活。結(jié)果表明，溶瘤病毒能夠多次為T細胞呈遞抗原，并且介導CAR T細胞對腫瘤的免疫反應(yīng)。

    03 非臨床研究中動物模型的抑癌效力測試（體內(nèi)）

    接著，研究人員繼續(xù)在小鼠腫瘤模型中嘗試這種策略。他們發(fā)現(xiàn)，將OV19t與CAR-T細胞聯(lián)合產(chǎn)生了強大的協(xié)同效應(yīng)，治愈了超過一半的小鼠，~60%的小鼠完全緩解，而僅22%單獨接受OV19t治療的小鼠腫瘤完全消退。

    研究者們還發(fā)現(xiàn)，在接受聯(lián)合治療的小鼠中，OV19t會持續(xù)向癌細胞擴散，被殺死的腫瘤細胞會釋放額外的病毒拷貝，使鄰近的腫瘤細胞表達CD19，導致了顯著更強的腫瘤細胞殺傷活性。更重要的是，當用癌細胞再次挑戰(zhàn)被治愈的小鼠時，未有新的腫瘤形成，表明這種病毒-CAR-T聯(lián)合方案幫助建立了腫瘤特異性免疫記憶，可阻止癌癥復發(fā)。

    04 CD19-CAR T療法接到的腫瘤殺傷可以釋放溶瘤病毒OV19t

    為了考察這種方法是否可以克服溶瘤病毒對實體瘤的次優(yōu)或不均勻感染，實驗人員測試了殺傷后的腫瘤細胞是否可以在實體瘤的環(huán)境中釋放溶瘤病毒片段。結(jié)果顯示，CD19-CAR-T細胞介導的腫瘤殺傷促進了病毒顆粒的釋放以及持續(xù)的腫瘤細胞感染。除了表達CD19t，研究還證實，引入病毒逆轉(zhuǎn)了腫瘤惡劣的微環(huán)境，使其更容易接受CAR-T細胞治療。

    這一發(fā)現(xiàn)為實體瘤的治療方案提供了新的思路和希望，整合CAR-T療法和溶瘤病毒帶來更好的療效。美迪西也將持續(xù)關(guān)注腫瘤免疫療法的新進展和新思路，并利用不斷完善的腫瘤免疫療法評價平臺，助力研發(fā)。