美迪西根據(jù)客戶的需求提供各種有效的動物模型，用來檢測藥物的有效性。實驗動物有非人類靈長動物、狗、小鼠、大鼠、家兔、豚鼠、裸鼠等各種種類。目前，我們已經(jīng)建立多個有效動物腫瘤模型，并經(jīng)過多方驗證和長期實踐考驗。同時，我們員工豐富的經(jīng)驗與雄厚的理論基礎能夠靈活地根據(jù)客戶的定制要求開發(fā)建立各種定制腫瘤模型以滿足客的需求。下圖為美迪西常見腫瘤模型及腫瘤模型細胞：

美迪西腫瘤模型服務

小鼠腫瘤模型的建立

腫瘤是由機體中某些細胞基因發(fā)生突變?yōu)樘卣鞯囊环N全身性疾病，它的危害不僅在于它損害身體的各器官，而且還會產(chǎn)生各種腫瘤并發(fā)癥，如轉(zhuǎn)移、積水、疼痛等，最終導致身體各器官功能衰竭而危及患者的生命。對腫瘤的研究一般都是在人類疾病動物模型的基礎上展開的。建立一個完全反映人類疾病的動物模型比較困難，但可依據(jù)不同的實驗目的選擇相應的動物實驗模型。   

    小鼠腫瘤模型

1、實驗動物的選擇

可用作腫瘤模型的動物有很多，小鼠腫瘤模型作為其中一種常用模型主要因為有以下幾個優(yōu)點。
(1)易獲得，常用的腫瘤模型小鼠通常采用SPF級小鼠，SPF級小鼠一般醫(yī)學院校及研究所都能買到。
(2)生長周期短，一般小鼠腫瘤模型兩周左右就能長大，能大大縮短實驗周期。
(3)易操作，小鼠的動物實驗操作一般簡便，因此可適當增加組內(nèi)樣本數(shù)量，使實驗數(shù)據(jù)更具說服力。    

2、理想的建立腫瘤模型應具備的條件    

(1)腫瘤生長的過程應與人類腫瘤生長過程相似，做到盡可能復制出與人類腫瘤相同的模型。  
(2)制作模型的方法簡單易行。  
(3)動物模型的重復性要好，要能滿足實驗的多次重復試驗結(jié)果穩(wěn)定性好。 
(4)采用的建模方法對實驗人員和環(huán)境無危害或危害較小。   

3、腫瘤來源的選擇

    現(xiàn)在世界上保有近500種的動物移植瘤，但常用于篩藥的不到40種，多數(shù)為小鼠腫瘤，其次是大鼠和倉鼠移植瘤，包括小鼠L1210淋巴白血病，P1534淋巴白血病，艾氏腹水瘤，F(xiàn)riehd病毒白血病，肉瘤180，白血病P388，Lewis肺癌，腺癌755，白血病615，Walker-256，吉田肉瘤，肉瘤45，Liol淋巴瘤，Dunning白血病，Ｗagner癌肉瘤，白血病L5170Y，P1798淋巴肉瘤，LPC-1漿細胞瘤，淋巴瘤8，B16或Cloadman黑色素瘤，Ridaway骨肉瘤，Gardner淋巴肉瘤，肉瘤37，P315白血病，Murhy-sturm淋巴肉瘤，Jensen肉瘤，Geurin氏癌，倉鼠十二指腸腺癌和人體肉瘤HSL第1代雜交鼠移植。它們對抗癌藥作用的敏感性大致可分為敏感，中度敏感，低敏感和不敏感瘤株四類，同樣敏感株對抗癌藥的療效水平也不相同。    

4、常用的腫瘤建模方法   

4.1 自發(fā)或誘發(fā)小鼠腫瘤模型             

    自發(fā)性腫瘤模型是指利用實驗動物本身某種自發(fā)腫瘤發(fā)病率高所建立的動物模型，如利用AKR小鼠建立白血病模型、利用C3H小鼠建立乳腺癌模型。優(yōu)點：自發(fā)性腫瘤通常比用實驗方法誘發(fā)的腫瘤與人類所患的腫瘤更為相似，有利于將試驗結(jié)果推用到人；這一類腫瘤發(fā)生的條件比較自然，有可能通過細致觀察和統(tǒng)計分析而發(fā)現(xiàn)原來沒有發(fā)現(xiàn)的環(huán)境致癌因子。缺點：腫瘤的發(fā)生率參差不齊，不可能在短時間內(nèi)獲得大量的腫瘤學材料，觀察時間長，實驗消耗大。  誘發(fā)性腫瘤模型是指對實驗動物給予致癌物質(zhì)、射線以及某些致病病毒而誘發(fā)各種腫瘤的動物模型。常用的誘癌物有放射線局部照射、化學致癌物(烷化劑、亞硝胺類、芳香胺類)、生物毒素(黃曲酶毒素)、細菌(幽門螺桿菌)、腫瘤病毒感染。如7，12一二甲基苯蒽誘發(fā)的小鼠惡性腫瘤動物模型，四氯化碳乙醇誘導小鼠原發(fā)性肝癌，利用二乙基亞硝胺誘發(fā)小鼠肺癌；利用甲基膽葸誘發(fā)小鼠胃癌和宮頸癌；感染小鼠白血病病毒可誘發(fā)白血病等等。誘癌方法分為原位誘發(fā)和異位誘發(fā)，原位誘發(fā)：指將致癌物直接與動物靶組織或靶器官接觸而誘發(fā)該組織或器官發(fā)生腫瘤，接觸方法可通過涂抹、灌注、喂養(yǎng)或埋置等。異位誘發(fā)：將與致癌物接觸后的動物組織或器官埋置于該動物或另一正常動物皮下而產(chǎn)生的該組織或器官的腫瘤。異位誘發(fā)腫瘤具有易于觀察和取材的優(yōu)點。    

4.2 移植型小鼠腫瘤模型

    移植性腫瘤模型是將腫瘤細胞接種于相關(guān)種屬的實驗動物所建立的動物模型。移植模型分為同種移植和異種移植，同種移植就是用于移植的腫瘤細胞來源于同系或同種動物，此種移植一般不會產(chǎn)生免疫排斥現(xiàn)象或排斥現(xiàn)象很小，方法一般最常用的就是SPF級小鼠皮下移植和原位移植。裸鼠因為沒有免疫排斥作用，因此為理想的異種移植受體，但裸鼠飼養(yǎng)條件要求太高，一般基礎實驗可以不選用此法。  常用的將腫瘤移植如體內(nèi)的方法有腫瘤組織塊移植法，腫瘤組織懸液移植法，腫瘤細胞培養(yǎng)液移植法和腹水瘤細胞移植法。組織塊移植法操作復雜，成功率不高，目前已基本不使用此法造模。目前較常用的是采用腫瘤組織懸液移植法和腫瘤細胞培養(yǎng)液移植法進行皮下移植或原位移植。其基本操作步驟為首先收集腫瘤細胞懸液，皮下移植常采用的接種量為每只0.2ml,腫瘤細胞數(shù)為1×10 6個。原位移植由于受接種體積限制，所以可以將腫瘤細胞懸液濃度提升至1×10 7個/ml。張煜等采用原位注射細胞懸液法成功獲得小鼠肝癌模型，其模型成功率高，穩(wěn)定性好。但需注意的是，在科學實驗中，要警惕移植瘤株生物學特性的改變， 包括：傳代后組織學類型，生長特性(接種成活率，生長速度，自動消退率，宿主壽命與宿主反應等)，侵襲和轉(zhuǎn)移特性以及對化療藥物敏感性等的改變。    

4.3 轉(zhuǎn)基因小鼠腫瘤模型 
轉(zhuǎn)基因技術(shù)是把外源基因用實驗方法導入動物基因組中, 并使之在動物體內(nèi)表達的一種技術(shù)。轉(zhuǎn)基因動物技術(shù)包括四個重要步驟: ①靶基因(被導入的外源基因, 又稱目的基因、轉(zhuǎn)基因)的獲得和改建; ②靶基因向生殖細胞或ES 細胞轉(zhuǎn)移; ③受精卵或胚胎組織的發(fā)育; ④篩選、鑒定和穩(wěn)定轉(zhuǎn)基因動物品系。  Gordon等。在20世紀80年代初創(chuàng)立了轉(zhuǎn)基因小鼠技術(shù)。轉(zhuǎn)基因小鼠是指通過不同的方法將外源基因?qū)胄∈笫芫眩缓螽a(chǎn)生攜帶外源基因的小鼠品系，并能通過生殖細胞將外源基因傳遞給后代的小鼠。現(xiàn)在最常用的轉(zhuǎn)基因方法是顯微注射法，該法始于1974年，Jaenisch等用顯微注射法將多瘤病毒SV 40的DNA 導入到小鼠的囊胚(blastocyst)中 ， 在子代小鼠的肝、腎組織中檢測到了SV 40的DNA 。這一結(jié)果證明，將外源基因?qū)肱咛ゼ毎胁崿F(xiàn)整合是可能的。  在此基礎上，人們又開發(fā)了可誘導的轉(zhuǎn)基因技術(shù)，該技術(shù)可以調(diào)控轉(zhuǎn)基因模型的基因表達，目前，最常用的是反式因子rtTA與四環(huán)素衍生物強力霉素結(jié)合后激活四環(huán)素操縱子表達的方法(tet-on)，而tTA與強力霉素結(jié)合則起抑制四環(huán)素操縱子表達的作用(tet-off)。這樣，tet-on轉(zhuǎn)基因小鼠可以通過攝入四環(huán)素的方法激活癌基因的表達；tet-off轉(zhuǎn)基因小鼠則持續(xù)表達癌基因，直至因強力霉素的攝入而被特異性抑制。應用此系統(tǒng)已構(gòu)建了可誘導性表達c-myc和SV40Tag的轉(zhuǎn)基因小鼠腫瘤模型。   
4.4 基因敲除腫瘤小鼠模型

    隨著基因打靶技術(shù)的進步,基因敲除腫瘤小鼠模型的研究已經(jīng)有了長足的發(fā)展 ,其種類 也越來越多。基因敲除又稱基因打靶，是指利用外源 DNA與受體細胞染色體 DNA上的同源序列之間發(fā)生重組，使之整合到預定位點上，并替代原有基因，從而改變細胞遺傳性的方法。利用此方法產(chǎn)生的去除特定基因的小鼠模型 稱為基因敲除小鼠模型。這其中包括①同源重組法，可產(chǎn)生目的基因完全缺失的小鼠，但發(fā)現(xiàn)這些小鼠往往會有較高的致死率，生長發(fā)育遲緩不育或主要的器官系統(tǒng)發(fā)育缺陷。②Cre / l oxP誘導的條件敲除體系法，可在特殊的部位或特定的生長階段使目的基因缺失，這個方法的最大好處就是大大降低了致死率。

聯(lián)系我們

    郵箱：marketing@medicilon.com.cn

    電話：021 58591500

    相關(guān)內(nèi)容推薦