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酵母表達(dá)系統(tǒng)優(yōu)缺點(diǎn)
優(yōu)點(diǎn):克服大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)的不足,能繁殖快,高密度發(fā)酵,可以進(jìn)行蛋白質(zhì)翻譯后的修飾合加工。
缺點(diǎn):缺乏強(qiáng)有力的受?chē)?yán)格調(diào)控的啟動(dòng)子,分泌效率低,尤其是對(duì)于分子質(zhì)量大于30KD的目的蛋白分子幾乎不分泌。不適于高密度培養(yǎng)。甲醇酵母表達(dá)系統(tǒng):具有翻譯后加工的功能,有適合真核生物基因產(chǎn)物正確折疊的細(xì)胞內(nèi)環(huán)境和糖鏈加工系統(tǒng)。還能分泌目的基因產(chǎn)物導(dǎo)培養(yǎng)液中,有利于純化等。
酵母表達(dá)系統(tǒng)是研究真核蛋白質(zhì)表達(dá)和分析的有力工具,包括畢赤酵母表達(dá)系統(tǒng)和釀酒酵母表達(dá)系統(tǒng),其擁有轉(zhuǎn)錄后加工修飾功能,適合于穩(wěn)定表達(dá)有功能的外源蛋白質(zhì)。與昆蟲(chóng)表達(dá)系統(tǒng)和哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)相比,酵母表達(dá)系統(tǒng)操作簡(jiǎn)單,成本低廉,可大規(guī)模進(jìn)行發(fā)酵,是較理想的重組真核蛋白質(zhì)生產(chǎn)制備工具。
酵母表達(dá)系統(tǒng)的分類
釀酒酵母表達(dá)系統(tǒng)(釀酒酵母系統(tǒng)啟動(dòng)子、釀酒酵母分泌系統(tǒng)、釀酒酵母糖基化系統(tǒng)、釀酒酵母表達(dá)系統(tǒng)存在的問(wèn)題)甲醇酵母表達(dá)系統(tǒng)(優(yōu)缺點(diǎn))A、表達(dá)水平高(最高水平的系統(tǒng))B、產(chǎn)物可翻譯后修飾:糖基化、磷酸化、酰脂化C、過(guò)糖基化程度比釀酒酵母少(8-15個(gè)vs100-150個(gè)甘露糖)D、產(chǎn)物可正確折疊和高效分泌(最高分泌表達(dá)系統(tǒng))E、可利用簡(jiǎn)單無(wú)機(jī)鹽培養(yǎng)基高密度發(fā)酵,生物量大。F、實(shí)驗(yàn)室和工業(yè)操作簡(jiǎn)單G、不能滿足結(jié)構(gòu)要求嚴(yán)格的糖基化其它酵母表達(dá)系統(tǒng)
美迪西酵母表達(dá)系統(tǒng)服務(wù)內(nèi)容
美迪西科研人員建立了成熟的酵母表達(dá)純化服務(wù)平臺(tái),提供優(yōu)質(zhì)的重組蛋白在畢赤酵母和釀酒酵母中的表達(dá)與純化服務(wù)。
酵母表達(dá)系統(tǒng)服務(wù)項(xiàng)目:重組酵母表達(dá)質(zhì)粒構(gòu)建;重組質(zhì)粒電轉(zhuǎn)化;重組表達(dá)子篩選;小規(guī)模蛋白表達(dá)和純化(2L培養(yǎng)基培養(yǎng)產(chǎn)物);大規(guī)模蛋白表達(dá)和純化(10L以上)。
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