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服務(wù)項(xiàng)目
項(xiàng)目步驟| 步驟 | 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容 | 實(shí)驗(yàn)時(shí)間 | 備注 |
|---|---|---|---|
| 1 | 重組酵母表達(dá)質(zhì)粒構(gòu)建 | 2 周 | 可選擇不同載體；不同親和標(biāo)簽；分泌或胞內(nèi)表達(dá) |
| 2 | 重組質(zhì)粒電轉(zhuǎn)化 | 1周 | 不同表達(dá)菌株可選， PCR 鑒定5-10個(gè)克隆 |
| 3 | 重組表達(dá)子篩選 | 3-4周 | 5-10個(gè)克隆篩選， Zeocin抗生素濃度篩選重組子，結(jié)合Western blot 方法鑒定重組蛋白表達(dá) |
| 4 | 小規(guī)模蛋白表達(dá)和純化 | 2-4周 | 優(yōu)化培養(yǎng)基，菌體密度，甲醇濃度，誘導(dǎo)時(shí)間等 |
| 5 | 大規(guī)模蛋白表達(dá)和純化 | 根據(jù)表達(dá)體積商定 | 可選擇搖瓶或者發(fā)酵罐培養(yǎng) |
您可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇上述任一實(shí)驗(yàn)內(nèi)容，或相關(guān)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的組合
純化時(shí)選用親和純化、離子柱純化、疏水填料純化和分子篩純化； 蛋白本身特性，表達(dá)系統(tǒng)的選擇會(huì)影響最終蛋白的純度和活性。
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