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雙靶點CAR-T的脫靶檢測可以采用多種方法,包括MPA試驗、組織交叉反應(TCR)和體外細胞殺傷試驗等。以MPA試驗為例,其檢測過程需要根據雙CAR的結構策略來進行抗體的合成和開展MPA試驗。總體原則是合成的、用于MPA檢測的抗體結構要盡量反映T細胞表面表達的CAR的真實結構。例如,如果雙CAR是串聯在一起的,即它們形成了一個二價串聯抗原識別結構,那么可以合成一個類似的二價串聯抗體進行MPA檢測,來評估CAR-T對不同抗原的特異性結合能力,從而判斷其是否存在脫靶效應。如果雙CAR是分開的,那么需要分別針對每個靶點,合成含有CAR結構的抗體,然后進行兩個獨立的MPA檢測。